土壤全磷的測定

土壤全磷量即磷的總貯量，包括有機(jī)磷和無機(jī)磷兩大類。土壤中的磷素大部分是以遲效性狀態(tài)存在，因此土壤全磷含量并不能作為土壤磷素供應(yīng)的指標(biāo)，全磷含量高時(shí)并不意味著磷素供應(yīng)充足，而全磷含量低于某一水平時(shí)，卻可能意味著磷素供應(yīng)不足。因此了解土壤磷總貯量，對生產(chǎn)實(shí)踐僅有一定的參考價(jià)值。
  土壤全磷測定的待測液制備，一般分為堿熔法和酸溶法兩類。在堿熔法中以Na2CO3熔融分解最為完全，準(zhǔn)確度較高，但熔融時(shí)需要鉑坩堝，不適宜用于常規(guī)分析。在酸溶法中以   H2SO4———HCLO4法較好。此法對鈣質(zhì)土壤分解率較高，但對酸性土壤分解不易十分完全，結(jié)果往往稍微偏低。
  待測液中磷的測定，一般都采用鉬藍(lán)比色法，所用的顯色劑有“鉬銻抗”（鉬酸銨—酒石酸銻鉀—抗壞血酸試劑的簡稱），氯化亞錫，抗壞血酸和1，2，4—氨基萘酚磺酸等。其中鉬銻抗法有手續(xù)簡便，顏色穩(wěn)定，干擾離子允許量大等優(yōu)點(diǎn)，目前國內(nèi)應(yīng)用較廣。
1．酸溶—鉬銻抗比色法：
    （1）方法要點(diǎn)：在高溫條件下，土壤中含磷礦物和有機(jī)磷化合物與高沸點(diǎn)的H2SO4和強(qiáng)氧化劑HCLO4作用，使之完全分解，全部轉(zhuǎn)化為正磷鹽而進(jìn)入溶液，然后用鉬銻抗比色法測定。
   （2）主要儀器：分光光度計(jì)，2KVA方電爐，3KVA調(diào)壓變壓器。
 （3）試劑： A．濃H2SO4（二級）。 B．HCLO4（二級，70~72%）。C．鉬銻貯存液。濃H2SO4（二級）153毫升緩慢倒入約400毫升水中，攪拌，冷卻。10克鉬酸銨（二級）溶解于約60。C的300毫升水中，冷卻。然后將H2SO4溶液緩緩倒入鉬酸銨溶液中，再加入100毫升0.5%酒石酸銻鉀溶液，最后用水移釋至1升，避光貯存。此貯存液含1%鉬酸銨，5.5摩爾/升1/2H2SO4。 D．鉬銻抗顯色劑。1.50克抗壞血酸溶液于100毫升鉬銻貯存液中。此液須隨配隨用，有效期一天。E．二硝基酚指示劑。0.2克2，6-二硝基酚或2，4二硝基酚溶于1000毫升水中。F．5ppmP標(biāo)準(zhǔn)溶液。0.4390克KH2PO4（二級，105。C烘過2小時(shí)）溶于200毫升水中，加入5毫升濃H2SO4，轉(zhuǎn)入1升容量瓶中，用水定容。此為100ppmP標(biāo)準(zhǔn)溶液，可以長期保存。取此溶液準(zhǔn)確稀釋20倍，即為5ppmP標(biāo)準(zhǔn)溶液，此溶液不宜久存。
（4）操作步驟：A．待測液的制備：稱取通過100目的烘干土壤樣品1克（精確到0.0001克）置于50毫克三角瓶中，以少量水濕潤，加入濃H2SO48毫升，搖動(dòng)后（最好放置過夜）再加入70~72%的HCLO410滴，搖勻，再加熱消煮。緩慢升溫，HCLO4煙霧消失后，再提高溫度，使H2SO4發(fā)煙回流，待瓶內(nèi)溶液開始轉(zhuǎn)白后繼續(xù)消煮20分鐘，全部消煮時(shí)間為45~60分鐘。將冷卻后的消煮液用水小心地沖入100毫升容量瓶中，沖洗時(shí)用水應(yīng)量少次多，輕輕搖動(dòng)容量瓶，待完全冷卻后，以水定容，用干燥漏斗和無磷濾紙將溶液濾入干燥的100毫升三角瓶中。同時(shí)做空白試驗(yàn)。B．測定：取上述待測液2~10毫升（含5~25微克P）于50毫升容量瓶中，用水稀釋至約30毫升，加二硝基酚指示劑2滴，用稀NaOH溶液和稀H2SO4溶液調(diào)節(jié)pH值至溶液剛呈微黃色。然后加入鉬銻抗顯色劑5毫升，搖勻，用水定容，。在室溫高于15。C的條件下放置30分鐘后，在分光光度計(jì)上用波長700納米比色，以空白試驗(yàn)溶液為參比液調(diào)零點(diǎn)，讀取吸假值。在工作曲線上查出顯色液的Pppm數(shù)。顏色在8小時(shí)內(nèi)可保持穩(wěn)定。C．工作曲線的繪制：分別吸取5ppm標(biāo)準(zhǔn)溶液0，1，2，3，4，5，6毫升于50毫升容量瓶中，加水稀釋至約30毫升，加入鉬銻抗顯色劑5毫升，搖勻，定容。即得0，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6ppmP標(biāo)準(zhǔn)毓溶液，與待測液同時(shí)比色，讀取吸收值。在方格坐標(biāo)紙上以吸收值為縱坐標(biāo)，Pppm數(shù)為橫坐標(biāo)紙上以吸收值為縱坐標(biāo)，Pppm數(shù)為橫坐標(biāo)，繪制成工作曲線。

    2．堿熔—鉬銻抗比色法
（1）方法要點(diǎn)：樣品用Na2CO3高溫熔融，使難溶性的磷酸鹽及有機(jī)態(tài)磷分解成可溶性正磷酸鹽，以稀H2SO4溶解熔融物，制備成待測液，用鉬銻抗比色法測定。
（2）主要儀器：鉑坩堝，高溫電爐，分光光度計(jì)。
  （3）試劑：
    A：無水Na2CO3（二級），磨細(xì)，通過250微米（60目）。
    B：6摩爾/升1/2 H2SO4
     其余試劑同酸溶一鉬銻抗比色法。
 （4）操作步驟；稱取通過100目的烘干土樣品0.25（精確到0.0001克）置于鉑坩堝中，另外稱取研細(xì)的無水Na2CO32克，將其中的1.8克小心地用平頭玻璃棒與樣品充分?jǐn)嚢杌靹?，其余的鋪于混合物表面，并輕輕敲動(dòng)坩堝，鋪平。將坩堝放入高溫電爐中，升溫至900~920。C熔融，20分鐘后取出后趁熱時(shí)揭蓋觀察熔塊狀態(tài)：倘若表面成凹形顏色均一而氣泡時(shí)，則熔融已完全。取出熔塊，放入100毫升高型燒杯中，蓋上表面皿，小心地加入約10毫升6摩爾/升1/2H2SO4溶解熔塊，并用熱水洗凈坩堝。將燒杯中的內(nèi)溶物洗入100毫升容量瓶中，用熱水及帶橡皮帚玻璃棒將燒杯洗凈，洗滌液均倒入上述容量瓶中，冷卻后定容，用干燥漏斗及無磷濾紙過濾于三角瓶中。
吸取濾液5~10毫升（含5~25微克P）于50毫升容量瓶中加水稀釋至約30毫升，用鉬銻抗比色法測定磷量（同酸溶—鉬銻抗比色法）。在整個(gè)操作過程中，同時(shí)作試劑空白試驗(yàn)。
（5）結(jié)果計(jì)算：同酸溶—鉬銻抗比色法。

　
 
土壤有效磷的測定
土壤有效磷的測定是合理施用磷肥的依據(jù)之一。浸提劑的選擇主要根據(jù)各種土壤性質(zhì)而定。在目前使用較廣的幾種浸提劑中，一般認(rèn)為以0.03摩爾/升NH4F—0.025摩爾/升HCL浸提劑比較適合于風(fēng)化程度較高的酸性土壤；石灰性土壤通常用0.5摩爾/升NaHCO3(pH值為8.5)浸提比較滿意；對于中性和酸性水稻土NH4F—HCL法和NaHCO3法都有應(yīng)用。土壤有效磷含量只是一個(gè)相對的指標(biāo)，同一土壤用不同方法測得的有效磷量可以相差很多，即使用同一浸提劑，由于浸提條件如土液比、溫度、時(shí)間、振蕩方法在相同條件下測得的結(jié)果才有相互比較的意義。也不能根據(jù)結(jié)果直接來計(jì)算施肥量。因此，在報(bào)告有效磷結(jié)果時(shí)必須同時(shí)說明所用的測定方法。
1．0.5摩爾/升NaHCO3浸提—鉬銻抗比色法：
（1）方法要點(diǎn)：石灰性土壤中的磷主要以磷酸鈣的形態(tài)存在，中性土壤中則磷酸鈣鹽、磷酸鋁鹽磷酸鐵鹽都占有一定的比例。0.5摩爾/升NaHCO3可以抑制Ca2+的活性，使某些活性較大的磷權(quán)鈣鹽中的磷被浸提出來；同時(shí)，也可使活性較強(qiáng)的磷酸鐵、磷酸鋁起水解作用而浸出。浸出液中的磷用鉬銻抗比色法測定。
（2）主要儀器：往復(fù)振蕩機(jī)，分光光度計(jì)。
（3）試劑：
  A．0.5摩爾/升NaHCO3(pH值為8.5)浸提劑。42.0克NaHCO3（三級）溶于約800毫升水中，稀釋至約990毫升，用4摩爾/升NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值至8.5（用pH計(jì)測定），最后稀釋到1升，置于塑料瓶中，此溶液隨配隨用，不宜久存。
B．無磷活性炭。將活性炭粉先用1:1HCL浸泡過夜，然后在平板漏斗上抽氣過濾，用水洗到無Cl-為止。再用0.5摩爾/升NaHCO3溶液浸泡過夜，在平板漏斗上抽氣過濾，用水洗盡NaHCO3，最后檢查到無磷為止，烘干備用。
其余試劑同全磷分析中酸溶—鉬銻抗比色法。
（4）操作步驟：稱取通過1毫米篩孔的風(fēng)干土壤樣品5.00克；置于250毫升三角瓶中，加入一小匙無磷活性炭粉和0.5摩爾/升NaHCO3浸提劑100毫升，在20~25。C振蕩30分鐘（振蕩機(jī)速率每分鐘150~180次），取出后用干燥漏斗和無磷濾紙過濾于三角瓶中，同時(shí)，做試劑空白試驗(yàn)。
吸取浸出液10~20毫升（含5~25微克P）于50毫升容量瓶中，加水稀釋至約30毫升，加入二硝基酚指示劑2滴，用稀H2SO4和稀NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值至溶液剛呈微黃色，等CO2充分放出后，用鉬銻抗比色法測定（同全磷測定酸溶—鉬銻抗比色法）。
（5）計(jì)算結(jié)果（未錄）
 2．0.03摩爾/升NH4F—0.025摩爾/升HCL浸提—鉬銻譏比色法：
（1方法要點(diǎn)：酸性土壤中的磷主要是以酸磷鐵和磷酸鋁的形態(tài)存在，利用F-酸性溶液中絡(luò)合Fe3+和Al3+的能力，可使這類土壤中活性較強(qiáng)的磷酸鐵、磷酸鋁鹽被活化釋放，同時(shí)由于H+的作用，也能溶解出部分磷酸鈣鹽。
 (2)主要儀器：往復(fù)振蕩機(jī)，分光光度計(jì)。
（3）試劑：
A．0.03摩爾/升NH4F—0.025摩爾/升HCl浸提劑。1.11NH4F（三級）溶于800毫升水中，加1.0摩爾/升HCL25毫升，然后稀釋至1升，貯于塑料瓶中。
B．0.8摩爾/升H3BO3溶液：
其余試劑同全磷測定中堿熔—鉬銻抗比色法。
（4）操作步驟：稱取通過1毫米篩孔的風(fēng)干土壤樣品5.00克，置于150毫升塑料瓶中，加入0.03摩爾/升NH4F—0.025摩爾/升HCl浸提劑50毫升，在20~25。C振蕩30分鐘（振蕩機(jī)速率為每分鐘150~180次），取出后立即用干燥漏斗和無磷濾紙過濾于塑料瓶中。
吸取濾液10~20毫升（含5~25微克P）于50毫升容量瓶中，加入10毫升0.8摩爾/升H3BO3溶液，再加入二硝基酚指示劑2滴，用稀HCl和NH4OH溶液調(diào)節(jié)pH值至待測液呈微黃，用鉬銻抗比色法測定磷（同全磷測定中酸溶—鉬銻抗比色法），同時(shí)作空白試驗(yàn)。
（5）結(jié)果計(jì)算；同0.5摩爾/升NaH-CO3浸提—鉬銻抗比色法。
3．兩種浸提劑測得的土壤有效磷，參考指標(biāo)：見表3.2-1。
表3.2—1  土壤有效磷用兩種浸提劑測得的指標(biāo)（P，pmm）