測定的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng),微孔板包被有針對麻痹性毒素(PSP)抗體的捕捉抗體,加入標準或樣品溶液及麻痹性毒素(PSP)酶標記物,游離麻痹性毒素(PSP)與麻痹性毒素(PSP)酶標記物競爭麻痹性毒素(PSP)抗體,同時麻痹性毒素(PSP)抗體與捕捉抗體連接。沒有結(jié)合的酶標記物在洗滌步驟中被除去。將酶基質(zhì)(過氧化尿素)和發(fā)色劑(四甲基聯(lián)苯胺)加入到孔中并且孵育。結(jié)合的酶標記物將無色的發(fā)色劑轉(zhuǎn)化為藍色的產(chǎn)物。加入反應(yīng)停止液后使顏色由藍轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。在450nm測量,吸光強度與樣品中的濃度成反比。
提供的試劑
每一個盒中的試劑足夠進行48個測量(包括標準分析孔),盒中的材料如下
·48孔板(6條 × 8孔)包被有針對麻痹性毒素(PSP)抗體的捕捉抗體。
·麻痹性毒素(PSP)標準液,1.3 ml/瓶,標準液濃度為0ppb,2.5ppb,5ppb,10ppb,20ppb,40ppb 直接應(yīng)用
· 酶標記物濃縮液(0.3ml).………………….………紅色帽
·抗體濃縮液(0.3ml).……………………….………黑色帽
·基質(zhì)/發(fā)色劑(6ml).………………….……………白色滴瓶
·反應(yīng)停止液1N硫酸(6ml).……………….………黃色滴瓶
·緩沖液(50ml)用于樣品,酶標記物及抗體的稀釋