用途:
本試劑盒用于甜餅,餅干,谷類食品,巧克力,冰淇淋等樣品中花生過敏原殘留物的定量檢測。
方法:
本測試法為夾心ELISA,可提供濃度為百萬分之一(ppm)的過敏原精確濃度。通過將樣品先在水浴槽中與磷酸鹽緩沖液振蕩后離心或過濾的方法,從樣品中提取出所有存在的花生過敏原殘留物。從濾液中取樣,并加入到抗(捕捉性抗體)包被的微孔中。所有沒有結(jié)合的過敏原被沖洗除去,之后加入酶標(biāo)抗體(檢測性抗體)。酶標(biāo)抗體結(jié)合到已經(jīng)被捕捉性抗體結(jié)合的奶類過敏原上。經(jīng)過第二次洗滌之后,加入底物,在檢測性抗體存在的情況下,發(fā)生顏色反應(yīng)。加入終止液,用微孔板讀數(shù)儀測定吸光度值。對照組的吸光度值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,樣品的吸光度值對標(biāo)準(zhǔn)曲線作圖,通過計(jì)算得出樣品中花生過敏原的精確濃度。
步驟:
測試之前樣品須經(jīng)提取處理。
1.向轉(zhuǎn)移孔中加入150ul的對照和提取的樣品
2.轉(zhuǎn)移100ul到抗體包被的微孔中,保溫10分鐘
3.傾倒出抗體包被微孔中的液體
4.用洗滌液充分洗滌微孔,在紙巾上使液體全部流出
5.用12通道微量移液器從反應(yīng)液儲(chǔ)槽中轉(zhuǎn)移100ul交聯(lián)物加入到各抗體包被的微孔中,保溫10分鐘
6.重復(fù)步驟3,4,即傾倒出液體,用洗滌液充分洗滌,流出全部液體
7.用12通道微量移液器從反應(yīng)液儲(chǔ)槽中轉(zhuǎn)移100ul底物加入到各抗體包被的微孔中,保溫10分鐘
8.從反應(yīng)液儲(chǔ)槽中轉(zhuǎn)移100ul紅色終止液加入到各抗體包被的微孔中
9.用微孔板讀數(shù)儀讀取結(jié)果
產(chǎn)品規(guī)格:
線形范圍: 2.5-25ppm
對照濃度: 0,2.5,5,10,25ppm
測試時(shí)間: 30min
試劑盒可完成的測試個(gè)數(shù): 38